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“TOP OF QUALITY – 2006”

Aprenda como calcular o Fator, do manual a automação!!!!  

        Na realização de testes cinéticos para determinação das enzimas, muitas vezes nos deparamos com algumas dificuldades, no momento de definir o Fator de Calibração exato de trabalho.

       Isto acontece porque o Fator depende de uma série de variáveis, que devem ser computadas juntas, para então chegarmos ao seu valor.

Estas variáveis são:

1-     Volume de Amostra (VA);

2-     Volume de Reagente (VR);

3-     Volume de Diluente (VD), quando utilizado;

4-     Volume Total (VT), que é igual a VA+VR+VD;

5-     Caminho óptico do equipamento em centímetros (C) e

6-     Coeficiente de Absortividade do Composto Corado/Substrato (@).

       Este último, o @, trata-se em última análise de “ o quanto de um composto absorve a luz, em um dado comprimento de onda, num caminho óptico de 1 cm e na concentração de 1mM”.

       A tabela abaixo mostra os @ de vários compostos correspondentes aos vários reagentes Bio Técnica, com seus respectivos comprimentos de onda.

Reagente Substrato / Co-substrato @ compr de onda
Alfa-amilase GalG2-CloroNitroFenol
14,5
405
Creatina Quinase (CK) NADP
6,3
340
Creatina Quinase - MB (CKMB) NADP
6,3
340
Desidrogenase Lactica (LDH) NADH
6,3
340
Fosfatase Alcalina (FAL) p-NitroFenilFosfato (p-NPP)
18,5
405
Gama Glutamil Transferase (GGT) Gama-Glutamil p-Nitroanilida
9,5
405
Transaminase Glutamato Oxalacética (TGO) NADH
6,3
340
Transaminase Glutamato Pirúvica (TGP) NADH 6,3
340

        Tendo agora em mãos os @ de todos os compostos dos reagentes Bio Técnica, basta agora utilizar a fórmula abaixo e obter o Fator para QUALQUER equipamento.

 FATOR = VT x 1000 / VA x @ x C

 Exemplo 1 : Fator da Gama GT no COBAS

Fator = 210 x 1000 / 10 x 9,5 x 0,6 = 3685

 Exemplo 2 : Fator da Gama GT no Bio2000

Fator = 1100 x 1000 / 100 x 9,5 x 1,0 = 1158

  ATENÇÃO: Alguns aparelhos possuem caminhos ópticos diferentes de 1 cm como os COBAS (0,6 cm), o AYRONE ( 0,85 cm) e etc...

  

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